大肠杆菌感受态的制备注意事项，具体有以下几个方面：
第一、在整个实验操作的过程当中，所使用的试管、枪头、离心管、量液器等器皿及用具都要在无菌的条件下进行，要求在高压条件下灭菌处理；
第二、在实验过程中，注意所有应用的试剂、DNA酶都不能与其他的试剂相混淆，防止互相交叉感染，以免影响转化的效果；
第三、用于制备感受态细胞的菌液，最好是从零下20℃或零下70℃保存的菌液当中直接转接；
第四、不要用储存在4℃的培养菌液，或者已经多次转接、用过的培养菌液，要注意细胞的生长状态和密度。