多发性硬化症要详细的询问患者病史，进行详细的查体。影像学检查对于多发性硬化症的患者非常重要，需要进行头颅磁共振检查和脊髓磁共振检查，可以清楚的反映病灶，对鉴别诊断有很大的作用。
还要进行血液方面的检查，包括血生化、血常规和风湿免疫相关的检查，除外其它疾患，腰穿也是必须要做的检查，可以发现寡克隆区带，对于诊断多发性硬化也有很大的作用。
还可以做肌电图检查，如视觉诱发电位。
此外还可以查血清的水通道蛋白，可以除外视神经脊髓炎谱系疾病。总之，多发性硬化的检查很多，最重要的是磁共振检查和腰穿检查。