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    胚胎学的研究方法有哪些
    2023-08-09 16:48:41阅读-
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    胚胎学的研究方法有哪些

    胚胎学的研究方法科学研究的进展,总是离不开实验方法的改良和技术的创新。胚胎学的研究方法,从简单的肉眼观察、显微镜观察到分子生物学技术的应用,极大地推动了胚胎学研究的进展,具体如下:

    1、鸡胚实验:将鸡胚孵化至特定的发育阶段,应用鸡胚作为胚胎发育的研究模型,进行显微镜观察和描述,还可以在胚胎早期进行显微操作。随着分子生物学技术的发展,如RNA干扰、基因转染、基因组测序等技术应用,以及鸡胚的实验周期短,容易操作对研究胚胎发育的相关基因的功能奠定了良好的实验基础。

    2、胚胎切片和活体观察:应用切片技术,制作胚胎的连续切片,将每张切片的图像,用图像分析技术进行计算机处理,可以获得胚胎立体结构图像。用肉眼和显微镜对活体胚胎的局部和整体发育进行观察,获得活体胚胎的动态活动状态。

    3、转基因动物实验:把改建后的目的基因用显微注射等方法注入实验动物的受精卵,将此受精卵植入受体动物的输卵管或子宫,使转基因动物携带有外源基因。该实验方法被广泛应用在基因功能分析遗传病研究、疾病模式动物建立等。

    4、示踪技术:把带有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的逆转录病毒导入胚胎细胞,观察胚胎发育过程中表达绿色荧光蛋白细胞的迁移、定居和分化,研究胚胎发育过程中特定细胞的动态分化过程。

    示踪技术也常用无细胞毒性的活体染料,如台盼蓝、辣根过氧化酶等。

    5、显微操作技术:应用显微手术进行组织移植或组织切除,可以自体组织移植,也可以同种异体组织移植或异种组织移植。在临床上,也常应用显微操作技术分离切割卵裂球,进行植入前遗传学检测。在宫内手术时,应用显微操作技术治疗先天性膈疝、梗阻性脑积水等。

    6、胚胎干细胞技术:胚胎干细胞是一类未分化的二倍体多能干细胞,具有无限增殖、自我更新和多向分化潜能,可以分化出神经细胞心肌细胞、血细胞等,为细胞治疗奠定了基础。

    7、基因编辑技术:基因编辑指根据科研或临床实际需要对目的基因进行插入、移除或替换等遗传操作,以引入预定DNA片段或修复突变基因等,从而达到控生物性状和行为的目的。基因编辑技术在科研工作中作为实验工具为基因重组、模式生物制备、物种改良等发挥了重要的作用。

    第一代基因编辑技术采用核酸内切酶对DNA进行切割,DNA断裂后利用自身的同源重组完成修复过程;第二代基因编辑则采用引导核酸加核酸内切酶技术,成簇规律性间隔短回文重复相关蛋白技术,实现基于碱基配对原理修复或重组DNA,提升了基因编辑的精确性。

    8、体细胞克隆技术:又称为体细胞核移植技术,是指把动物体细胞经过抑制培养,使细胞处于休眠状态。采用核移植的方法,用细胞拆合或细胞重组技术,将卵母细胞去核作为核受体,以体细胞或含少量细胞质的细胞核即核质体作为核供体,将后者移人前者中,构建重组胚,核供体在去核卵母细胞的胞质中重新编程,并启动卵裂,开始胚胎发育过程,妊娠产仔。

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