腰穿是通过穿刺针穿入蛛网膜下腔收集脑脊液或者蛛网膜下腔给药的一种操作。首先病人侧卧位，头低、屈膝、大腿尽量贴近肚子呈蜷曲状，穿刺点位于腰椎3、4间隙或者2、3间隙，一般髂棘的连线为腰3、4间隙和腰4椎体。定位以后局部消毒、铺无菌巾，穿刺点使用2%利多卡因进行局部麻醉。之后用腰穿针垂直于皮肤进针，依次穿过皮肤、皮下、棘上韧带、棘间韧带、黄韧带、硬膜、蛛网膜，在穿刺的过程中可以感到两次突破感。第一次突破感是穿破黄韧带的突破感，第二次是穿破硬膜的突破感。当针穿破硬膜以后，拔出针芯可以见到脑脊液流出，收集脑脊液或者通过腰穿针在蛛网膜下腔给予药物治疗。