试管婴儿一、二、三代之间的区别主要是在于受精方式，以及对胚胎进行操作来决定，具体如下：
1、第一代试管婴儿，即常说的体外受精胚胎移植，将精子和卵子进行优化以后，直接在体外放在一起，进行受精后发育成胚胎，再移植到子宫腔里面去生长和发育。
2、第二代试管婴儿，主要适用于精子比较少无法与卵子受精，同时精子的活力比较差的患者。在胚胎师的帮助下将单个优质精子直接注入卵子细胞，进行受精形成胚胎，再继续培养移植回子宫腔。
3、第三代试管婴儿，主要适用于有遗传性疾病患者，有疾病的胚胎需进行筛选。检查胚胎细胞是否带有异常染色体或者基因，选择正常的胚胎移植，在胚胎水平上有较大的操作，甚至有创。
严格来说一、二、三代试管不是递进的关系，也就是说不是越来越好的关系，只是适用不同人群。