正常情况下，由于睾酮的调节机制，早晨血清睾酮的浓度会比夜间要高出20%-40%，正常成年男性上午的血清睾酮浓度正常值为12-40nmol/L。
男性血液中的睾酮主要由睾丸分泌，少量的由肾上腺分泌，分泌的睾酮进入血液后，只有2%以游离的形式存在。大约65%的睾酮与性激素结合蛋白结合，大约33%的睾酮与血清白蛋白结合。
游离的睾酮属于活性状态，结合它的睾酮是暂时的储存形式，两者处于动态平衡，共同维持游离睾酮的血浆浓度。男性大约在16岁以后，血清睾酮的水平会明显的升高，到40岁以后血清睾酮的水平会逐渐的下降。