支原体感染一般2-3周可以被检查出来，支原体的潜伏期较长，通常为潜伏2-3周，发病前2-3天直至病愈后数周，均可在呼吸道分泌物中发现支原体。起病后两周，约2/3的病人冷凝集试验阳性，滴度效价大于1:32，链球菌MG凝集试验效价大于或等于1:40，连续两次四倍以上增高有诊断的价值，特别是当滴度逐渐升高时有诊断价值。支原体感染的诊断还包括血常规检查、病原学检查、PCR检查，主要情况如下：
1、血常规检查：可见白细胞总数正常或稍增高，以中性粒细胞为主。
2、病原学检查：通过留取痰、鼻和咽拭子等处的标本，经标本送细菌培养，培养分离出支原体，对诊断具有决定性的意义。
3、普通PCR技术检查：检测支原体特异性的DNA，具有快速、简便、特异等优点，敏感性高于细胞分离技术，用套式PCR检测可显著提高其敏感性。