确诊布病时，先确诊疑似病例，符合布鲁氏杆菌病流行病学史及临床表现，就可以作为疑似病诊断。疑似诊断确定之后，再进行临床诊断。在疑似诊断基础上，同时虎红平板凝集试验阳性、胶体金免疫层析试验阳性、酶联免疫吸附试验阳性，或者是布鲁氏杆菌培养涂片革兰氏染色检出疑似布鲁氏杆菌，即可认为临床诊断。
临床诊断之后，再做确定诊断，符合临床诊断和确定诊断的患者，同时从患者的血液、骨髓，以及其它体液、排泄物等，任何一种病理材料培养物中分离到布鲁氏杆菌，就可以作为确定诊断。