尿路感染验尿是最重要的诊断手段之一，主要包括以下检查，即尿常规、尿细菌培养。尿常规当中尿液理学检查，外观有可能会出现浑浊，尿液生化方面，亚硝酸盐有可能会变成阳性，为细菌代谢产物。白细胞酯酶正常值为阴性，而尿路感染时会出现阳性。
尿蛋白正常时为阴性，尿路感染可出现蛋白尿，不过通常小于2g/24h。对于尿沉渣镜检，一般会出现尿白细胞增加，每高倍视野超过五个一般认为是有感染。非离心尿中，白细胞每立方毫米超过十个认为是有感染。镜下血尿有时会出现在尿路感染者当中，尿细菌培养通常可以鉴定是哪种细菌引起的尿路感染，并且能够做药物敏感性测试。因此，也是一个很重要的检查项目。