眼底打针指玻璃体腔注射，操作与肌肉注射相同。术中会让患者向某个方向看，暴露出注射部位，通常是在角膜缘后3.5-4.0mm处。由于此处不存在较多痛觉神经，同时已经在结膜囊内使用麻药，所以并不会由于进针而产生明显痛觉。

手术通过细针从巩膜到眼内进行注射，多数时间在进行消毒工作，冲洗结膜囊并使用聚维酮碘浸泡，使结膜囊处于无菌状态，再进行眼内注射。但由于聚维酮碘属于杀菌药物，若患者存在干眼症、角膜损伤等问题，则可能在消毒时自觉眼睛疼痛。此时可嘱患者在术前使用干眼症的眼药水保护角膜，从而减轻症状。