阴道镜本身是镜子，对于阴道起放大作用，可以看到宫颈本身的情况，做阴道镜本身不疼。
一般来讲，使用阴道镜不是目的，主要是通过阴道镜将阴道、宫颈，以及外阴的病变予以放大，使得取活体更有可靠性。而取活体究竟是否疼痛要看取活体的部位。
一般来讲宫颈神经比较小，所以取活体时常常没有明确的疼痛。而外阴常常富含神经，取活体时有时会出现比较明显的疼痛，而阴道神经也不丰富，所以取活体也不会产生严重的疼痛。可见做阴道镜是否疼痛，需要根据取活体的部位进行判断。
而对于老年女性，由于宫颈癌常常好发于宫颈管内，所以需要进行宫颈管的诊刮，会有一定的痛感。所以不同的情况做阴道镜，取活体时，其痛感各不相同。