甲状旁腺功能亢进主要诊断依据是血清甲状旁腺激素水平上升。原发甲旁亢中，甲状旁腺激素升高可伴有血钙升高，但部分病人血钙正常，这是因为血钙不仅仅受甲状旁腺素调节，同时也受肾脏调节。部分病人低血钙也会导致甲状旁腺素升高，但这是正常现象，这是在动员骨质中的钙向血液中释放。如果血钙正常，甚至血钙高于正常值，甲状旁腺激素仍然升高，就提示甲状旁腺功能亢进。