雌激素六项检查通常情况下需要空腹进行。由于雌孕激素在女性月经期变化不同，建议生殖激素六项检查需要在月经见红的第2-5天之间空腹抽血化验，才能更准确判断激素水平。此时雌孕激素比例会达到一定指标，有助于医生判断雌孕激素是否达标。

特殊情况下生殖激素六项检查无需空腹，受检者可以在进食少量碳水化合物之后的半个小时内进行检查。