血清C肽常需要空腹测定，通常空腹血清C肽测定正常值是0.3-1.3nmol/L，在口服葡萄糖后30分钟-1小时出现高峰，其峰值为空腹的5-6倍。
血清C肽是胰岛素原生成胰岛素时的裂解产物，其与胰岛素等分子分泌，但无胰岛素的生物活性，测定血清C肽可间接了解胰岛素水平，但其与胰岛素无交叉反应，因此不受外源性胰岛素和胰岛素抗体的影响。
一般在进行血清C肽测定时，要求检测前12-14小时开始禁食，可饮水，停用胰岛素和降血糖药，避免精神紧张、剧烈运动等，然后用不含添加剂的采血管采集静脉血2mL，离心并分离血清进行测定，其正常值是0.3-1.3nmol/L。
如果测定后发现空腹血清C肽升高，则提示肝硬化、胰岛β细胞瘤，当其降低时则提示糖尿病，或其水平不高而胰岛素增高，提示为外源性高胰岛素血症，如胰岛素用量过大。
空腹血清C肽测定常用于糖尿病的分型诊断，且可以真实反应实际胰岛素水平，也可以指导胰岛素用量的调整，还可监测胰腺手术效果，临床较为常用。
