骨髓纤维化的诊断主要依靠血液学检查、骨髓穿刺术检查、X线检查。一部分患者需要做肝脾穿刺，如果患者有巨脾、外周血象、泪滴状红细胞及幼粒及幼红细胞性贫血、多次骨髓干抽，骨髓活检发现胶原纤维增生，则可作出诊断。肝脾淋巴结穿刺可发现造血灶，提示髓样增生，本病须与各种原因引起的脾大相鉴别。此外，一些恶性肿瘤的骨髓转移以及血液系统肿瘤，如白血病、淋巴瘤等也可引起继发骨髓纤维组织增生，也应与本病相鉴别。