手术要求实施无菌操作，在阴道超声下引导取卵，患者排空膀胱采取膀胱截石位，阴道探头上涂上耦合剂后套上经气体消毒的乳胶薄膜套。装上穿刺针后置入阴道。做常规扫描检查后活动阴道探头，清晰显示目标卵泡，应用培养液冲洗穿刺针，流入试管内培养液倒掉，沿针导管置入穿刺针，快速穿过阴道壁，迅速刺入目标卵泡中央，加负压吸引，快速回旋小范围来回抽动穿刺针，卵泡液持续流出，直到目标卵泡完全塌陷。装卵泡液的试管经过手术室与胚胎实验室窗口送入实验室，一侧穿刺结束后再行穿刺另侧。