1、粪便和尿液检查：大多数患者粪便潜血试验持续阳性，多有轻度贫血，尿胆红素阳性而尿胆原阴性，帮助诊断疾病。
2、血液检查：血清总胆红素和结合胆红素升高，碱性磷酸酶、γ -谷氨酰转肽酶升高，转氨酶轻至中度升高，CA19-9升高，对疾病的诊断有帮助。
3、B超：B超可示肝内外胆管扩张，胆囊增大。但对壶腹周围癌本身的诊断率较低，这是由于该部位常有十二指肠及胃内积气掩盖所致。
4、CT、磁共振检查：可显示肿瘤的位置、大小以及与周围血管的关系，可见胆总管、胰管均扩张或仅胆管扩张;有时可见扩张的胆总管内有软组织影，十二指肠肠腔内有增强后明显强化的结节影。磁共振检查对于胆道成像，从而整体观察胆道系统、壶腹周围癌是否合并肝脏转移有重要价值。
5、ERCP(内镜逆行胰胆管造影)：可直视观察十二指肠内侧壁和乳头情况，可见乳头肿大、表面不规则、呈结节状、质脆易出血，活检进行病理学确诊。
6、 PTC(经皮经肝胆管造影术)：PTC可显示肝内外胆管扩张，胆总管呈“V”字形不规则充盈缺损或闭塞，有定位诊断和鉴别诊断价值。