体外测定免疫细胞的功能，首先要从不同材料中分离所需细胞。根据细胞的表面标志、理化性质及功能设计和选择不同的分离方法。
其中包括外周血单个核细胞的分离。外周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞。PBMC是免疫学实验最常用的细胞，也是分离纯化T、B细胞的第一步。常用的分离方法是淋巴细胞分离液密度梯度离心法，其原理是根据外周血各种血细胞比重不同，使不同密度的细胞呈梯度分布。红细胞密度最大，沉至管底；多形核白细胞的密度为1.092，铺于红细胞上，呈乳白色；PBMC的密度约为1.075，分布于淋巴细胞分离液上面；最上层是血浆。