1、直接镜检：取皮屑、脓液、甲屑、角膜溃疡刮取物、活体组织及尸体组织标本等，显微镜下可见分枝、分隔的菌丝，类似曲霉的镜下特征。
2、真菌培养：在沙保培养基上，气生菌丝丰富，镜下可见大、小分生孢子形态多样。
3、皮损活组织检查：可见大小和形态不一的肉芽肿，中央可有坏死，有中性粒细胞、组织细胞和少数多核巨细胞浸润，镰孢霉可散布于这些细胞中，有时亦可有淋巴细胞浸润。镰孢霉呈圆或长圆形，孢子染成淡蓝色，用乌洛托品硝酸银染色可见肠形细胞。