1、血常规+网织红细胞比例+涂片镜检：原发性骨髓纤维化早期，红细胞数正常或轻度升高，约1/2～1/3患者在初次就诊时已有轻度或中度正细胞正色素性贫血。骨髓纤维化病变晚期时，患者可出现严重的顽固性贫血。骨髓纤维化患者外周血中网织红细胞轻度增高，外周血片中成熟红细胞常呈现大小不一及畸形，同时见到泪滴状、椭圆形、靶形或多嗜性红细胞及有核红细胞。白细胞总数高低不一，诊断时部分患者为正常的(4～10)×109/L，约有半数病例白细胞计数增高，其中多数达到(10～20)×10^9/L，个别白细胞总数高达100×10^9/L，但一般极少超过(60～70)×10^9/L，部分病例，约15%～25%的患者白细胞总数减少到(2～4)×10^9/L。血小板计数高低不等，早期约50%病例血小板数可增高，个别高达1000×10^9/L，但随着疾病的进展，尤其晚期患者，血小板减少的比例日渐增加，造血功能减退及脾功能亢进是主要原因。
2、骨髓活检：可见到大量网状纤维组织，早期全血细胞增生伴纤维组织增生，中期骨髓萎缩及纤维化，晚期骨髓纤维化或骨质硬化。
3、X线检查：典型表现为骨密度的不均匀性增加，伴斑点状透明区，形成“毛玻璃”现象，还可见到新骨形成及骨膜花变样增厚。
4、分子生物学及细胞遗传学：50%患者可检出JAK2V617F、JAKexon12突变，部分患者有MPL或CALR突变检测。
5、血液生化：肝肾功能、自身免疫性抗体、铁蛋白、血清叶酸及维生素B12水平。