24小时尿标本的留取方法是需要留取24小时的尿液，患者可于早晨七点起床后将第一次尿液排尽，此后收集每次尿液，装入留尿容器内，留尿容器内需要预先加入防腐剂甲苯并混匀。
直到第二天清晨七点解最后一次尿液装入留尿容器内，也可以留取第一天上午任意时间点至第二天上午相同时间点的尿液。在留尿的过程中需要避免尿液的污染。
对于女性要避开月经期，平时的饮食和饮水量保持与日常相同。对于有乳糜尿的患者也不宜留取24小时，可能会影响检测的结果。