1、体格检查：心脏听诊心尖区有一响亮(≥3/Ⅵ)、较粗糙、音调高、时限较长的全收缩期吹风样杂音伴亢进的S3等体征来作初步的诊断。
2、X线检查：后前位见左心房、左心室阴影增大；右心缘可见双心房影，可见肺淤血。右前斜位示左心房扩张而使食管向后、向右移位，晚期出现右心室增大。
3、心电图检查：轻度二尖瓣关闭不全心电图可正常，中、重度有左心房肥大和左心室肥厚、劳损。
4、超声心动图检查：风湿性心瓣膜病患者可见瓣膜增厚，腱索、乳头肌增粗、缩短或延长，腱索断裂者可见“连枷样摆动”，瓣叶脱垂时可见“吊床样”改变。收缩期二尖瓣前后叶对合不良，并可见缝隙。二维UCG可显示关闭裂隙的具体位置或瓣叶裂孔、赘生物等。间接征象有左心室扩大、左室流出道增宽、左心房扩大及房室环扩张。
5、心导管检查：右心导管可显示肺动脉和肺毛细血管压力升高，心排血指数是否降低，目的是观察患者心脏的血液流动是否异常。
6、左心室造影：心脏收缩时可以见到造影剂反流入左心房，关闭不全程度重者造影反流量多，但左心室排血分数降低。