17α-羟孕酮是由肾上腺皮质及性腺产生的孕激素，也是类固醇激素合成的中间产物，孕酮活性很低。它的生理作用为促进肾上腺皮质合成皮质醇及促进性腺合成性激素，因此测定其含量有助于判断男性、女性性激素水平和女性生育功能是否正常，以及筛查新生儿疾病。
17α-羟孕酮可用于预测排卵、评估黄体功能以及了解妊娠后期的激素水平，还可用于筛查新生儿是否有先天性肾上腺皮质增生症。此外，17α-羟孕酮的测定还可用于分析男性和女性的普通痤疮、男性秃顶原因及一些不明原因的不育症。