1、体格检查：触诊时注意有无脾脏肿大，脾下缘位置。检查腹部有无压痛、反跳痛，淋巴结有无肿大，观察腹部有无瘀点、瘀斑等异常现象。
2、实验室检查：
（1）血常规：白细胞总数增高和中性粒细胞增多，常提示细菌性感染。白细胞减少或正常，淋巴细胞增多且出现异常，淋巴细胞者应考虑病毒性感染。白细胞减少者应考虑疟疾、伤寒等。脾肿大而血象呈全血细胞减少，多见于急性白血病、脾功能亢进、恶性组织细胞增多症。
（2）骨髓检查：急性白血病骨髓涂片可发现大量原始及幼稚细胞，恶性组织细胞增多在骨髓中可发现较多异形组织细胞。
（3）肝功能检查：可了解脾肿大是否和肝脏疾病有关，可做血清胆红素、转氨酶、白蛋白、球蛋白及蛋白电泳等检查。
（4）脾穿刺检查：怀疑有脾脓肿可经脾穿刺抽脓获得诊断，怀疑有疟疾、黑热病、髓外造血，均可通过脾穿刺涂片或病理切片以明确诊断。
3、B超与CT检查：能准确显示脾脏大小、形态以及与其他邻近器官(如肝、肾)的关系。