多发性硬化要询问患者的详细病史、详细体检，影像学检查对多发性硬化症患者相对重要，需头颅MRI、脊柱MRI检查，能清楚反映病变，对鉴别诊断起很大作用。除了其他疾病外，腰椎穿刺也是必要的检查，可以做肌电图，比如视觉诱发电位。
此外，还可检测血清水通道蛋白，排除视神经脊髓炎谱系疾病。简言之，多发性硬化症有许多检查，其中最重要的是核磁共振成像、腰椎穿刺。