1、影像学检查：
（1）X线检查：钡餐造影、低张十二指肠造影可显示肿瘤压迫的间接征象，即十二指肠曲增宽、降部内侧呈“反3"征象。
（2）腹部超声：作为初筛检查，可显示直径>2cm的肿瘤病灶胰管扩张、狭窄或中断。
（3）CT检查：诊断胰腺癌的首选方法，可发现最小直径为1cm的病灶，特别是高分辨薄层螺旋CT能获得不同时相的影像，从而清晰地观察到胰腺癌的部位，判断是否侵袭周围组织以及血管受累情况，进行较精确的分期。
（4）磁共振检查：对胰腺癌的诊断与CT相当，而磁共振胰胆管成像是非侵入性了解胆管和胰管情况的好方法。
（5）PET-CT检查：PET检测可以发现胰腺病灶，对腹腔和远处转移有明显的优势。
（6）CT血管重建：替代选择性腹腔血管造影显示胰内及胰周血管的状况，判断有无肿瘤侵犯。
（7）选择性动脉造影：经腹腔动脉做肠系膜上动脉、肝动脉、脾动脉选择性动脉造影，对显示胰体尾癌可能比超声和CT更有效。其显示胰腺肿块和血管推压移位征象，对于小胰癌(<2cm)诊断准确性可达88%，有助于判断病变范围和手术切除的可能性。
2、内镜检查：
（1）经内镜逆行性胰胆管造影术(ERCP)：造影可显示胰管梗阻、狭窄、扩张和截然中断，主胰管和胆总管同时截断后呈双管征(double-ductsign)。ERCP诊断胰腺癌的敏感性为95%，特异性为85%，但并非每个患者都需要做ERCP，病史典型、CT明确诊断者则不需要做。
（2）超声内镜(endoscopicultrasound，EUS)检测：EUS诊断的敏感性和特异性均优于CT，可发现<2cm肿瘤。目前认为对于CT发现可能切除的病灶后应再行EUS检查，因为后者对有无淋巴结转移和有无门脉血管浸润的敏感性和特异性均较高，对分期的准确性明显高于CT，EUS与ERCP配合能够显示<1cm的肿瘤。
（3）腹腔镜：直视下可发现癌肿病灶、腹膜和腹腔脏器转移灶。
3、肿瘤标志物检测：
（1）CA199检测：目前用来诊断胰腺癌的各项肿瘤标志物中敏感性和特异性最高的一项指标，但当胰腺癌<1cm时常为阴性，在其他消化道系统肿瘤如胃癌、胆管癌、大肠癌和良性疾病如肝硬化、胆管炎时也可升高。对于术前糖类抗原199升高的患者，它可作为监测术后复发和对辅助治疗疗效评估的指标。
（2）癌胚抗原检测：当患者患有胰腺癌时，通过该检查可以确定检查结果可能为阳性。
（3）CA50检测：诊断胰腺癌的特异性与敏感性与CA199类似，阳性还可见于胆囊癌、肝癌、卵巢癌、乳腺癌等。
（4）CA242检测：唾液酸化的鞘糖脂抗原，是胰腺癌和结肠癌的标志物。
（5）胰液和大便中K-ras检测：基因突变检查为诊断提供了新的前景，但仍需大量工作。
4、血尿粪检查：早期无异常发现，黄疸发生时结合胆红素可明显高于良性梗阻，血清碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶增高。约40%患者有血糖升高或糖耐量试验异常，约80%患者可有胰腺外分泌功能低下，约5%患者早期可有淀粉酶和脂肪酶升高，晚期因胰腺萎缩而降至正常。
5、病理组织学检查：十二指肠镜下可直接观察肿瘤在壶腹部有无浸润，通过活检取得病理组织，通过细胞刷得到脱落细胞。腹腔镜直视下可进行活检并收集脱落细胞，CT、EUS定位和引导下行细针穿刺可得到胰腺组织。