螺内酯结构与醛固酮相似，为醛固酮的竞争性抑制剂，可作用于肾脏远曲小管和集合管，阻断钠氢和钠钾交换，进而起到阻断醛固酮的保钠排钾作用。由于它仅作用于肾脏远曲小管以及集合管，对肾小管的其它各段并无作用，所以利尿作用较弱。

另外，螺内酯对醛固酮的其它靶器官也具有一定的作用，可用于对原发性醛固酮增多症的诊断以及治疗。同时对其它水肿性疾病、低钾血症和高血压可起到一定的作用。不过螺内酯也具有副作用，如导致男性乳房发育、阳痿、女性月经不调。