维生素B₁₂作为维生素的补充剂，主要用于治疗贫血如巨幼红细胞性贫血，主要副作用有低血钾以及高尿酸血症等。维生素B₁₂在使用过程中还需要关注注意事项，如痛风患者使用维生素B₁₂有可能导致血尿酸升高，从而诱发痛风，所以对于痛风患者，使用维生素B₁₂时应该加以注意。对于神经系统受损的患者，在诊断没有明确前，建议不要贸然使用维生素B₁₂，以免掩盖临床表现。

维生素B₁₂缺乏的同时，往往可能伴有叶酸缺乏，如果单纯补充维生素B₁₂，一般不能取得彻底的治疗效果，需要同时补充叶酸，这一系列治疗都需要在医生指导下进行。在使用维生素B₁₂治疗期间，如果使用抗生素，可能影响血清和红细胞中维生素B₁₂的含量测定，在同时使用抗生素时需要加以注意。