羟丁酸脱氢酶是生化检查的常用指标，也可以列入心肌酶谱内。若羟丁酸脱氢酶升高，首先要考虑有无心肌细胞坏死的可能，急性心肌梗死、风湿性心脏炎、急性心肌炎，包括病毒性心肌炎或其他各种类型病因，只要能导致心肌细胞坏死，便会引起羟丁酸脱氢酶升高。此外羟丁酸脱氢酶，不仅存在于心肌细胞内，机体的各个脏器、组织内都可能存在，如肝细胞、红细胞、肌肉细胞均可出现。
若羟丁酸脱氢酶为单一升高，则较难确定其来源，肝脏基础病变也可能导致羟丁酸脱氢酶升高，因此需结合临床表现及特异性指标进行进一步鉴别。若出现心绞痛、心律失常、发热，羟丁酸脱氢酶与肌钙蛋白同时升高，则考虑心肌炎或心肌梗死的可能。
