胰岛素注射采用皮下注射的方式，每次最好选用1ml注射器，以保证剂量准确。应选择无人体血管神经的皮下组织，避免注射到肌肉层。按照先短效、后中长效胰岛素的顺序抽取药物，混匀后注射。
胰岛素注射通常选择腹部、上臂外侧1/3处、双侧大腿外侧上1/3处和双侧臀部外上侧。每次必须更换位置，1个月内不要在同一部位注射2次，以免局部皮下脂肪萎缩、硬化。另外，由于运动可加快对胰岛素的吸收，所以注射时应避开锻炼部位。从腹部、上臂、大腿到臀部，胰岛素注射部位的吸收由快到慢，不同类型的胰岛素由于功效不同，所以注射部位的吸收速度也不尽相同，患者需要根据自身情况，在医生指导下注射。
超短效胰岛素类似物，吸收速率不受注射部位的影响，可在任何部位注射。短效胰岛素应选择腹部注射，可使胰岛素最快吸收。中长效胰岛素、长效胰岛素类似物建议选择大腿或臀部注射，可使胰岛素吸收缓慢。预混人胰岛素、预混胰岛素类似物建议早餐前，在腹部注射，可以加快胰岛素吸收，降低早餐后血糖，晚餐前大腿、臀部注射，可以延缓胰岛素的吸收，预防夜间低血糖。
